（6）将目的基因克隆到合适的表达载体上，导入宿主细胞，构建成高效、稳定的具有功能性表达能力的基因工程细胞，或转基因生物体系。

（7）利用工程技术大规模培养上述的基因工程细胞，获得大量的外源基因表达产物，或选育和建立转基因新品系。

（8）工程细胞表达产物的分离纯化，并最后获得所需的基因工程产品，或实验研究及推广应用转基因新品系。

上述8个步骤也可归并为两大部分，分属上游技术和下游技术。其中上游技术包括（1）~（5）；下游技术包括（6）~（8）。上游技术是基因克隆的核心与基础，下游技术则是上游基因克隆蓝图的体现和保证。

“好好好，这一段说的太好了，终于明白基因工程是怎么一回事了！”

李骁看得击节赞赏，赶紧掏出手机，把这8个步骤都拍照下来，打算作为今后自己展开基因工程实验的总

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（1）采用各种方法从复杂的生物体基因组中分离获得带有目的基因的DNA片段。

（2）在体外，将带有目的基因的外源DNA片段连接到具有自我复制功能及筛选标记的载体分子上，构建成重组DNA分子。

（3）将重组DNA分子转移到宿主细胞，并随宿主细胞的繁殖而扩增。

（4）从细胞繁殖群体中筛选出获得了重组DNA分子的受体细胞克隆（称为重组子）。

（5）从筛选出来的受体细胞中提取已经得到扩增的目的基因，以做进一步的分析鉴定。

第五章 基因工程技术 (第2/3页)

抬头望了一眼，看到那一厚摞的书籍，脸上流露出吃惊，偏头望了一眼，看清那一厚摞的书籍都是人类基因和细胞学相关，眼神中更是闪过了一丝异样。

李骁也不管别人异样的眼光，先拿起《基因工程原理与技术》，一头扎了进去。

……

一个完整的、用于生产目的的基因工程技术程序包括的基本步骤有以下几个主要方面。

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